熒光法溶解氧調制的綠光照到熒光物質上使其激發，并發出紅光，由于氧分子可以帶走能量（猝熄效應），所以激發紅光的時間和強度與氧分子的濃度成反比。我們采用了與藍光同步的紅光光源作為參比，測量激發紅光與參比光之間的相位差，并與內部標定值比對，從而計算出氧分子的濃度，經過溫度補償輸出終值。它一般可采用標準液標定或現場取樣標定。

　　(1)溶氧儀標準溶液標定法：標準溶液標定一般采用兩點標定，即零點標定和量程標定。零點標定溶液可采用2%的Na2SO3溶液。量程標定溶液可根據儀表測量量程選擇4M的KCl溶液(2mg/L);50%的甲醇溶液(21.9mg/L)。

　　(2)溶氧儀現場取樣標定法(Winkler法)：在溶氧儀實際使用中，多采用Winkler方法對溶解氧分析儀進行現場標定。使用該方法時存在兩種情況：取樣時儀表讀數為M1，化驗分析值為A，對儀表進行標定時儀表讀數仍為M1，這時只須調整儀表讀數等于A即可;取樣時儀表讀數為M1，化驗分析值為A，對儀表進行標定時儀表讀數改變為M2，這時就不能將調整儀表讀數等于A，而應將儀表讀數調整為1MA×M2。